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水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測中微生物檢測的質(zhì)量控制研究!

來源:國環(huán)檢測 日期:2019-11-08 22:35 點擊量:
  水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測在防治水污染、制定水環(huán)境標準方面發(fā)揮重要作用。水質(zhì)監(jiān)測質(zhì)量保證是一種保證監(jiān)測數(shù)據(jù)準確可靠的手段,是整個監(jiān)測過程的重要環(huán)節(jié)。在水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測中,水中微生物的檢測是一項重要內(nèi)容。本文從水質(zhì)監(jiān)測微生物樣品采集、實驗室檢測系統(tǒng)、水質(zhì)微生物樣品檢測中、結(jié)果評價系統(tǒng)等方面對水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測中微生物檢測的質(zhì)量控制進行了論述分析,以供相關(guān)從業(yè)人員借鑒參考。

  水質(zhì)監(jiān)測過程中,水中微生物在實驗室的檢測存在一些特別的問題,諸如在分析標準,已知加入量、參比樣品等,通常都不具備或不知道,因此個人判斷常常顯得更為必要。一個有效的質(zhì)量保證程序必須能控制從采樣到報告數(shù)據(jù)過程中所有足以影響檢驗結(jié)果的因素,這些因素包括采樣技術(shù)、實驗設(shè)備與器材、工作人員、材料供應(yīng)的品質(zhì)、培養(yǎng)基、分析測試步驟等等。以下就水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測中微生物檢測的質(zhì)量控制進行簡要分析。

  一、水質(zhì)監(jiān)測微生物樣品采集的質(zhì)量控制

  1、水質(zhì)監(jiān)測微生物實驗室先備齊采集微生物樣品的無菌采樣玻璃瓶

  許多水體隨時間和空間會發(fā)生很大變化,必須制定出合理的采樣規(guī)劃。為保證采集的水樣必須有代表性,采樣時固定取水點,同一時間;采水量應(yīng)為瓶容量的80%,以便在檢驗時充分混勻;采樣時應(yīng)直接采集,不得用水樣刷洗已滅菌的采樣瓶,并避免手指和其他物品對瓶口的玷污;采樣時不可攪動水底的沉積物;采集管網(wǎng)水的樣品前應(yīng)對水龍頭進行消毒,方法為用火焰在龍頭表面燒灼片刻(3~5秒),而后放水5~10分鐘。農(nóng)村生活用水部分水樣為蓄水池,需要備一個干凈的水桶,放入水池中數(shù)分鐘,盡量不取表面水,提水后將水灌入無菌瓶中,手注意不要接觸到無菌瓶口和瓶塞。

  2、水樣的保存達到減緩微生物繁殖的作用

  采用低溫冷藏箱來保存水樣,水樣全部采集后立即送回實驗室;在運輸中,玻璃容器要防止破裂,須有固定措施,防止樣品容器傾倒和樣品溢出。

  二、實驗室檢測系統(tǒng)的質(zhì)量控制

  1、主要實驗設(shè)備控制

  (1)溫度計或其它溫度計量一起每半年校對一次,以保證培養(yǎng)箱、冰箱、冷凍箱和干燥箱都能連續(xù)準確的反映操作溫度。

  (2)天平的使用應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程,定期進行檢定。

 ?。?)使用PH計,至少要配制兩種標準緩沖液(PH4.0,PH7.0或PH10)來校準PH計。

  (4)分析用水最好采用去離子水或蒸餾水,反對使用滲透水。

 ?。?)電熱滅菌箱應(yīng)定期(三個月)采用孢子試條或孢子懸浮液來測試其性能,確保操作準確顯示在160℃~180℃之間,己滅菌的器皿應(yīng)有標志區(qū)分。

 ?。?)高壓滅菌器也應(yīng)定期采用孢子試跳或孢予懸浮液檢驗其滅菌效果,每次使用要記錄好溫度、氣壓和滅菌時間。

  (7)膜濾裝置在使用前應(yīng)將部件組合起來,并檢查有無滲漏,必要時覆以硅酮,以增強過濾排放的效果。使用應(yīng)徹底清洗。

  (8)紫外燈應(yīng)每月定期擦試,每三個月一次使用紫外光度計測量紫外燈,以保持能使用紫外燈放出的紫外光在其最初放出的70%以上。

 ?。?)培養(yǎng)箱應(yīng)每天兩次檢查其使用溫度,培養(yǎng)箱應(yīng)置于室溫為16℃-27℃范圍的房間最佳。

 ?。?0)所使用的玻璃器具要求完整無損,清洗后要進行檢查,如果洗后表面有過多水珠附著,必須重洗。對于一種新的洗滌劑,使用前應(yīng)先檢驗其是否會留下對生物有抑制性的殘留物。必要時采用溴麝香草酚蘭或其它指示劑抽樣進行PH反應(yīng)試驗。

  2、實驗室環(huán)境控制

 ?。?)實驗室要求有良好的通風而且能夠避免灰塵、溫度變化,最終好能要用集中式空調(diào),這樣一來即能減少雜菌污染,又能保證培養(yǎng)箱的穩(wěn)定操作和減輕培養(yǎng)基、分析天平的受潮問題。

 ?。?)設(shè)計實驗室,以要工作時使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序為原則,并要具專門的區(qū)域供配制培養(yǎng)基和無菌操作用。

 ?。?)用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁,使之易于清洗和消毒,地面要求使指定的材料,做到放滲水、光滑、易于清潔;工作臺高寬適當、臺面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。

  (4)保持高度標準的清潔空氣。可采用RODAC平皿、細菌密度平皿或拭抹法來監(jiān)測空氣和臺桌面。

  3、對制成的培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

  每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)記錄有配制人,配制日期,培養(yǎng)基名稱和配制批次、數(shù)量、滅菌溫度和所使用時間、PH值以及培養(yǎng)基中是否配有不穩(wěn)定成分等。并進行無菌檢驗及陽性的陰性對照培養(yǎng)檢查。

  三、水質(zhì)微生物樣品檢測中的質(zhì)量控制

  微生物水樣采集后送至水質(zhì)檢測室,檢驗中所用的一切用品必須是完全滅菌的,在滅菌前應(yīng)徹底洗滌干凈。培養(yǎng)基和稀釋液按規(guī)定要求進行高壓蒸汽滅菌。

  1、檢測菌落總數(shù)的質(zhì)量控制

  在接種前應(yīng)將水樣充分搖勻,使水中的細菌均勻分布于水中,水樣稀釋時應(yīng)小心沿管壁加入,不要觸及管內(nèi)稀釋液,以防吸管尖外側(cè)部分粘附的檢液混入其中,將水樣注入皿內(nèi)時,從皿側(cè)加入,不要揭去皿蓋,最后將吸管直立使水流空,并在皿底干燥處再擦一下吸管尖將余液排出,而不要吹出。為防止產(chǎn)生片狀菌落,水樣加入平皿后,在20分鐘內(nèi)向皿內(nèi)傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,并立即混合均勻,皿內(nèi)瓊脂凝固后,不要放置長久后才翻轉(zhuǎn)培養(yǎng),而應(yīng)于瓊脂凝固后,在數(shù)分鐘內(nèi)將平皿翻轉(zhuǎn)進行培養(yǎng),這樣可避免菌落蔓延生長。

  2、檢測大腸菌群的質(zhì)量控制

  接種后搖動試管,使水樣與乳糖發(fā)酵管混勻;乳糖發(fā)酵試驗中常有產(chǎn)氣量少或產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的情況,有時倒管內(nèi)雖無氣體,但在液面及管壁卻可以看到緩緩上浮的小氣泡,這時不要放棄,繼續(xù)做下一步證實實驗。初發(fā)酵陽性則需進一步革蘭染色和繼續(xù)接種培養(yǎng)觀察。挑取菌落數(shù)與大腸菌群的檢出率有密切關(guān)系,一定要挑取典型菌落,如無應(yīng)多挑幾個以防假陰性。

  四、結(jié)果評價系統(tǒng)的質(zhì)量控制

  1、操作方法的精密度的度量

 ?。?)從某一特種型式的一批水樣中,選出最先15個陽性水樣,做雙樣分析。

 ?。?)計算每個數(shù)據(jù)的對數(shù),如果在任何一雙樣結(jié)果中有任一者為零,則都加1然后算對數(shù)值。

 ?。?)計算每個一雙對數(shù)的差城(用R表示),并且計算出這些差城的平均值(R)。

 ?。?)然后,取例行水樣中的10%,做雙樣分析。如果計算它們的差大于3.27R,則表示化驗員的精密度失控制,這時就應(yīng)該否定自從上一次精密度檢查后的分析結(jié)構(gòu)。找出原因,方可繼續(xù)分析。

  2、無菌性檢查

 ?。?)每做一次試驗,就必須用滅菌水為水樣,檢查培養(yǎng)基、濾膜、稀釋水、沖洗用水、玻璃器皿和器具的無菌性,如果有雜菌侵染,則用該材料做試驗所得的數(shù)據(jù)應(yīng)該否定。

 ?。?)每次試驗至少要對一個水樣做重復(fù)分析,原則上要對10%的水樣做出重復(fù)分析。

  (3)對多人操作的實驗室,應(yīng)進行對至少一個陽性水樣的平行分析,以便比較操作。

  近年來水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測已經(jīng)取得一定成績,常規(guī)監(jiān)測日趨成熟,水質(zhì)自動監(jiān)測正有計劃地逐步開展。我國水環(huán)境監(jiān)測方法可以歸為三類:自動監(jiān)測,常規(guī)監(jiān)測,應(yīng)急監(jiān)測,而水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測中水中微生物的檢測是其重要內(nèi)容,因此對其檢測質(zhì)量控制研究具有重要的現(xiàn)實意義。
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